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技术实证

 

腹泻专栏 | 浅谈仔猪流行性腹泻疫苗的研究进展日期:2019-06-05

 自1971 年,英国首先报道了猪流行性腹泻病毒后,在荷兰、德国等欧洲主要养猪大国相继被发现; 1976年,我国首次报道了猪流行性腹泻病毒。2010以后,我国各地区不同规模养猪场又出现了以变异株为主的猪流行性腹泻疫情,给养猪行业带来了重大的经济损失 。



本文对目前猪流行性腹泻各类疫苗特点、应用及前景作简单介绍。


传统疫苗


1、组织活苗

 组织活苗是指将分离到的腹泻病毒接种健康低日龄仔猪,发病后采集病毒载量较大的小肠等组织,经过进一步的过滤、浓缩和灭菌制成的疫苗。组织活苗的优点显而易见,对设备和人员要求低、制备简单、价格低廉一次制备可获取足量疫苗。但如接种病毒含量不确定、杂质无法确定和清除、接种应激大、灭菌不彻底、容易散毒,最重要的是疫苗容易受其它如蓝耳、猪瘟、伪狂犬等病毒污染。如果发病场本身生物安全不好、生产不稳定或存在潜伏感染,很容易造成二次发病。笔者曾经服务的一个规模化猪场,就曾因病料返饲控制腹泻,造成隐性猪瘟和蓝耳病的爆发,后续不到半年又爆发腹泻,直接损失超过5000头猪只。所以返饲是把双刃剑,要慎重选择。


2、组织灭活苗

 组织灭活苗简单来说就是制得组织活苗后进行灭活等处理,加以佐剂制成的疫苗。由于采取的是灭活的病毒或病毒感染的组织,故具有安全、相对容易运输和保存的特点。但是由于组织灭活苗制作工艺粗糙,存在抗原含量不均匀,灭活不彻底,使用不当,会造成猪场腹泻的反复发作。


3、细胞灭活苗

 细胞灭活疫苗是指将分离的毒株接种到适宜传代细胞系中,通过培养细胞获得大量病毒,然后灭活并制成的疫苗。与组织灭活苗相比,细胞灭活疫苗的生产工艺更为简单,成本较低,也能产生良好的保护效果。国内腹泻疫苗主要以细胞灭活疫苗为主。


 由于灭活疫苗的效果和保护期长短与其所采用的毒株和抗原含量密切相关, 而且灭活疫苗通过肌肉注射无法有效地激发机体的黏膜免疫要达到理想的免疫效果必须进行多次接种,这就给养猪场带来一定的负担,因此灭活苗必须要含有足够的抗原含量。另外,自2010年秋季以来,流行性腹泻病毒已经发生变异,原有的经典疫苗毒株CV777对最新流行的变异毒株保护力有限,因此导致了部分已经免疫经典株疫苗的猪场再次暴发了流行性腹泻,给猪场造成了巨大的经济损失。


 国内此类腹泻苗比较有代表性的有葡京在线官网的“利力佳”PEDV-TGEV二联灭活苗,抗原含量高(TCID50≥10?·?),批次间稳定性好,汉世伟百万头生猪的免疫验证,在国内5000头以上猪场拥有70%的占有率,免疫效果得到广大客户的肯定,而且对于最新流行的变异毒株,其也能够很好地保护,为客户防控流行性腹泻提供了帮助。





4、弱毒细胞苗

 弱毒疫苗是指经过传代等方式对病毒致病性致弱后制成的活疫苗,既保留了病毒的感染力,又不会造成发病。由于这类疫苗免疫后在机体内能够正常增殖,所以能持续的刺激机体产生免疫力。


 弱毒疫苗的优点是免疫原性好,可在不添加佐剂的情况下诱导较强的细胞免疫反应。由于弱毒疫苗是活的病原体,其病毒活性直接关系到了免疫效果,所以弱毒疫苗的保存和运输有一定的要求。另外, 弱毒疫苗毒株存在毒力返强的风险, 还有可能通过粪便向环境中排毒,对稳定的猪场来说是一个极大的防控风险。




新型疫苗


 随着基因工程技术的发展和人们对 PEDV 研究的加深,很多新型疫苗如亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、重组活载体疫苗、核酸疫苗已经处于研发中,国内市场上少有已经商品化的新型疫苗。


1、亚单位疫苗

 亚单位疫苗是以PEDV的抗原基因与表达质粒重组后,转移导入到适当的表达载体(例如大肠杆菌、杆状病毒等)当中,通过在载体中的高效表达获得大量的目的蛋白,并辅以佐剂,混合制成亚单位疫苗。


 亚单位疫苗具有免疫原性好、安全性高、不散毒等优点。亚单位疫苗的主要成分是病毒抗原蛋白,在体内的浓度会随着时间推移而减弱, 不能维持较长时间的有效免疫,对免疫动物的保护时间有限,需要进行多次免疫才能达到理想免疫效果,但却增加了养殖者的免疫成本。


2、病毒样颗粒疫苗

 病毒样颗粒 (VLPs) 疫苗就是将目的抗原基因与其他或同种病毒的单一或多个结构蛋白进行克隆重组并表达,自行装配,最后形成一个高度结构化的蛋白颗粒。由于病毒样颗粒不含核酸,没有复制能力,但是具有正常病毒的嗜性,能够进入宿主细胞,激发较为全面的免疫反应。但由于病毒样颗粒疫苗与亚单位疫苗都是蛋白质,其免疫的有效期还需要进一步的研究。


3、重组活载体疫苗

 重组活载体疫苗是以与病毒抗原基因重组后的质粒导入载体中制成的疫苗,能够持续有效地表达抗原。


 此外还有核酸疫苗等。


 PEDV的防控是一个系统工程,没有固定的标准和方案,但到目前为止,疫苗接种仍是防控病毒性疾病的最主要手段。笔者认为,针对目前流行性腹泻的主要流行毒株,在疫苗选择上,一定要含有变异毒株和抗原含量高的疫苗产品,这样才能为成功防控腹泻提供有力保障。


    (葡京在线官网  李明明)


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